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免疫親和柱在怎樣的條件下才能洗脫抗原？

更新日期：2022-07-05 信息來源：本站瀏覽次數(shù)：1812

　　免疫親和柱測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，抗體連接在柱體內(nèi)，樣品經(jīng)過提取、稀釋，在毒素與抗體結(jié)合，之后洗滌親和柱除去沒有被結(jié)合的其他無關(guān)物質(zhì)。用洗脫液洗脫毒素，然后注入到分析儀器中用于檢測。

　　免疫親和柱在標準的洗脫條件下很難洗脫的抗原一般是由多種化學鍵連接的。將幾種洗脫條件結(jié)合使用可以有效克服這些問題。

　　如果抗原不能用簡單的條件洗脫，更換抗體可能比試用各種條件要容易些。

　　一般使用過的層析柱比新柱洗脫更容易，所以新柱洗脫一般需要較苛刻的條件才能洗脫抗原。

　　試用梯度洗脫方法，使抗原的洗脫峰清晰而陡峭。

　　避免使用二硫蘇糖醇和其他還原劑，因其能破壞抗體重鏈和輕鏈間的鏈間二硫鍵。

　　值得注意的是當測試不同的洗脫條件時，有些緩沖液雖然不能洗脫抗原，但在其他條件改變后仍可能是有效的洗脫緩沖液。

　　實際上有些非洗脫緩沖液，可能改變抗原抗體反應(yīng)的平衡。例如高鹽條件具有疏水作用。應(yīng)用這些條件可以比較容易地收集抗體基質(zhì)上的抗原。

免疫親和柱

　　免疫親和柱的檢測方法：

　　霉菌毒素測定的主要方法有薄層色譜，高效液相色譜，熒光光度和酶聯(lián)免疫吸附等方法。這些方法的實驗原理和操作過程各不相同，對實驗結(jié)果的準確性和靈敏性造成影響的因素也是多種多樣。這其中有一點是共同的也是重要的影響因素，那就是檢測樣品的純度。高純度的樣品雜質(zhì)含量很低，減少了實驗過程中的干擾因素，從而提高了實驗結(jié)果的可靠性和穩(wěn)定性。因此，選擇合適的提取純化方法對霉菌毒素檢測至關(guān)重要。

　　傳統(tǒng)的霉菌毒素提純方法多采用有機溶劑萃取和化學吸附等方法，這些方法存在諸多不足之處：

　　1、特異性不高，純化效率低，純化效果差。

　　2、實驗靈敏度和重復(fù)性差。

　　3、操作過程煩瑣、復(fù)雜、時間長，勞動強度大。

　　4、使用有機溶劑容易造成環(huán)境污染，對操作人員傷害較大。

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