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柱平衡的影響：親水親脂平衡柱的柱平衡對(duì)分離效果具有重要影響。在平衡之前，要確保所使用的流動(dòng)相與柱子的保存溶劑（如乙腈/水）互溶。新柱在使用前應(yīng)先以一定倍數(shù)的柱體積的甲醇或純乙腈作為流動(dòng)相進(jìn)行沖洗。如果流動(dòng)相中含有緩沖鹽或離子對(duì)試劑，還應(yīng)注意在乙腈沖洗后用高比例水進(jìn)行“過(guò)渡”，以防止鹽析出。

流動(dòng)相的選擇：由于親水親脂平衡柱的特殊性質(zhì)，流動(dòng)相的選擇對(duì)于分離效果至關(guān)重要。需要選擇能夠同時(shí)滿足親水性和親脂性物質(zhì)分離的流動(dòng)相。

操作壓力：在使用固相萃取柱時(shí)，提供的真空壓力不應(yīng)過(guò)大，以避免對(duì)柱子造成損害。同時(shí)，系統(tǒng)的負(fù)壓力也應(yīng)控制在一定范圍內(nèi)。

安裝與檢查：固相萃取柱與接頭應(yīng)安裝配合好，確保系統(tǒng)能夠達(dá)到設(shè)定的壓力。在使用過(guò)程中，如果發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)壓力異常，應(yīng)檢查各接頭是否擰緊，氣壓蓋密封墊是否平整。

玻璃器件的放置：在操作過(guò)程中，玻璃器件應(yīng)放置平穩(wěn)，避免因?yàn)椴僮鞑划?dāng)導(dǎo)致柱子破損或液體濺出。